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前言:離心技術(shù)在生物科學(xué),特別是在生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究領(lǐng)域,已得到十分廣泛的應(yīng)用,每個(gè)生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室都要裝備多種型式的離心機(jī)。離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細(xì)胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決于顆粒的質(zhì)量、大小和密度。
基本的工作原理
當(dāng)一個(gè)粒子(生物大分子或細(xì)胞器)在高速旋轉(zhuǎn)下受到離心力作用時(shí),此離心力“F”由下式定義,即:
F=m•a=m•ω2r
a—粒子旋轉(zhuǎn)的加速度,m—沉降粒子的有效質(zhì)量,ω—粒子旋轉(zhuǎn)的角速度,r—粒子的旋轉(zhuǎn)半徑cm。
通常離心力常用地球引力的倍數(shù)來(lái)表示,因而稱(chēng)為相對(duì)離心力“RCF”?;蛘哂脭?shù)字乘“g”來(lái)表示,例如25000×g,則表示相對(duì)離心力為25000。相對(duì)離心力是指在離心場(chǎng)中,作用于顆粒的離心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù),單位是重力加速度“g”
(980cm/sec2),此時(shí)“RCF”相對(duì)離心力可用下式計(jì)算:
∴RCF=1.119×10-5×rpm2r
rpm—revolutionsperminute每分鐘轉(zhuǎn)數(shù),r/min
由上式可見(jiàn),只要給出旋轉(zhuǎn)半徑r,則RCF和rpm之間可以相互換算。但是由于轉(zhuǎn)頭的形狀及結(jié)構(gòu)的差異,使每臺(tái)離心機(jī)的離心管,從管口至管底的各點(diǎn)與旋轉(zhuǎn)軸之間的距離是不一樣的,所以在計(jì)算是規(guī)定旋轉(zhuǎn)半徑均用平均半徑“rav”代替:
rav=rmin+rmax/2
r的測(cè)量如下圖所示:
34º
rmin
旋轉(zhuǎn)軸rav
rmax
一般情況下,低速離心時(shí)常以轉(zhuǎn)速“rpm”來(lái)表示,高速離心時(shí)則以“g”表示。計(jì)算顆粒的相對(duì)離心力時(shí),應(yīng)注意離心管與旋轉(zhuǎn)軸中心的距離“r”不同,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,則所受離心力也不同。因此在報(bào)告超離心條件時(shí),通??偸怯玫匦囊Φ谋稊?shù)“×g”代替每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)“rpm”,因?yàn)樗梢哉鎸?shí)地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置的離心力及其動(dòng)態(tài)變化??萍嘉墨I(xiàn)中離心力的數(shù)據(jù)通常是指其平均值(RCFav),即離心管中點(diǎn)的離心力。
為便于進(jìn)行轉(zhuǎn)速和相對(duì)離心力之間的換算,Dole和Cotzias利用RCF的計(jì)算公式,制作了轉(zhuǎn)速“rpm”、相對(duì)離心力“RCF”和旋轉(zhuǎn)半徑“r”三者關(guān)系的列線圖,圖式法比公式計(jì)算法方便(列線圖參見(jiàn)附錄)。換算時(shí),先在r標(biāo)尺上取已知的半徑和在rpm標(biāo)尺上取已知的離心機(jī)轉(zhuǎn)數(shù),然后將這兩點(diǎn)間劃一條直線,與圖中RCF標(biāo)尺上的交叉點(diǎn)即為相應(yīng)的相對(duì)離心力數(shù)值。注意,若已知的轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標(biāo)尺的右邊,則應(yīng)讀取RCF標(biāo)尺右邊的數(shù)值,轉(zhuǎn)數(shù)值處于rpm標(biāo)尺左邊,則應(yīng)讀取RCF標(biāo)尺左邊的數(shù)值。
離心機(jī)的主要構(gòu)造和類(lèi)型
離心機(jī)可分為工業(yè)用離心機(jī)和實(shí)驗(yàn)用離心機(jī)。實(shí)驗(yàn)用離心機(jī)又分為制備性離心機(jī)和分析性離心機(jī),制備性離心機(jī)主要用于分離各種生物材料,每次分離的樣品容量比較大,分析性離心機(jī)一般都帶有光學(xué)系統(tǒng),主要用于研究純的生物大分子和顆粒的理化性質(zhì),依據(jù)待測(cè)物質(zhì)在離心場(chǎng)中的行為(用離心機(jī)中的光學(xué)系統(tǒng)連續(xù)監(jiān)測(cè)),能推斷物質(zhì)的純度、形狀和分子量等。分析性離心機(jī)都是超速離心機(jī)。
1.制備性離心機(jī)可分為三類(lèi):
?、牌胀x心機(jī):最大轉(zhuǎn)速6000rpm左右,最大相對(duì)離心力近6000×g,容量為幾十毫升至幾升,分離形式是固液沉降分離,轉(zhuǎn)子有角式和外擺式,其轉(zhuǎn)速不能?chē)?yán)格控制,通常不帶冷凍系統(tǒng),于室溫下操作,用于收集易沉降的大顆粒物質(zhì),如紅血球、酵母細(xì)胞等。這種離心機(jī)多用交流整流子電動(dòng)機(jī)驅(qū)動(dòng),電機(jī)的碳刷易磨損,轉(zhuǎn)速是用電壓調(diào)壓器調(diào)節(jié),起動(dòng)電流大,速度升降不均勻,一般轉(zhuǎn)頭是置于一個(gè)硬質(zhì)鋼軸上,因此精確地平衡離心管及內(nèi)容物就極為重要,否則會(huì)損壞離心機(jī)。
⑵高速冷凍離心機(jī):最大轉(zhuǎn)速為20000~25000rpm(r/min),最大相對(duì)離心力為89000×g,最大容量可達(dá)3升,分離形式也是固液沉降分離,轉(zhuǎn)頭配有各種角式轉(zhuǎn)頭、蕩平式轉(zhuǎn)頭、區(qū)帶轉(zhuǎn)頭、垂直轉(zhuǎn)頭和大容量連續(xù)流動(dòng)式轉(zhuǎn)頭、一般都有制冷系統(tǒng),以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量,離心室的溫度可以調(diào)節(jié)和維持在0~40C,轉(zhuǎn)速、溫度和時(shí)間都可以嚴(yán)格準(zhǔn)確地控制,并有指針或數(shù)字顯示,通常用于微生物菌體、細(xì)胞碎片、大細(xì)胞器、硫銨沉淀和免疫沉淀物等的分離純化工作,但不能有效地沉降病毒、小細(xì)胞器如核蛋白體或單個(gè)分子。
?、浅匐x心機(jī):轉(zhuǎn)速可達(dá)50000~80000rpm,相對(duì)離心力最大可達(dá)510000×g,最著名的生產(chǎn)廠商有美國(guó)的貝克曼公司和日本的日立公司等,離心容量由幾十毫升至2升,分離的形式是差速沉降分離和密度梯度區(qū)帶分離,離心管平衡允許的誤差要小于0.1克。超速離心機(jī)的出現(xiàn),使生物科學(xué)的研究領(lǐng)域有了新的擴(kuò)展,它能使過(guò)去僅僅在電子顯微鏡觀察到的亞細(xì)胞器得到分級(jí)分離,還可以分離病毒、核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。
超速離心機(jī)主要由驅(qū)動(dòng)和速度控制、溫度控制、真空系統(tǒng)和轉(zhuǎn)頭四部分組成。超速離心機(jī)的驅(qū)動(dòng)裝置是由水冷或風(fēng)冷電動(dòng)機(jī)通過(guò)精密齒輪箱或皮帶變速,或直接用變頻感應(yīng)電機(jī)驅(qū)動(dòng),并由微機(jī)進(jìn)行控制,由于驅(qū)動(dòng)軸的直徑較細(xì),因而在旋轉(zhuǎn)時(shí)此細(xì)軸可有一定的彈性彎曲,以適應(yīng)轉(zhuǎn)頭輕度的不平衡,而不致于引起震動(dòng)或轉(zhuǎn)軸損傷,除速度控制系統(tǒng)外,還有一個(gè)過(guò)速保護(hù)系統(tǒng),以防止轉(zhuǎn)速超過(guò)轉(zhuǎn)頭最大規(guī)定轉(zhuǎn)速而引起轉(zhuǎn)頭的撕裂或爆炸,為此,離心腔用能承受此種爆炸的裝甲鋼板密閉。
溫度控制是由安裝在轉(zhuǎn)頭下面的紅外線射量感受器直接并連續(xù)監(jiān)測(cè)離心腔的溫度,以保證更準(zhǔn)確更靈敏的溫度調(diào)控,這種紅外線溫控比高速離心機(jī)的熱電偶控制裝置更敏感,更準(zhǔn)確。
超速離心機(jī)裝有真空系統(tǒng),這是它與高速離心機(jī)的主要區(qū)別。離心機(jī)的速度在2000rpm以下時(shí),空氣與旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭之間的磨擦只產(chǎn)生少量的熱,速度超過(guò)20000rpm時(shí),由磨擦產(chǎn)生的熱量顯著增大,當(dāng)速度在40000rpm以上時(shí),由磨擦產(chǎn)生的熱量就成為嚴(yán)重問(wèn)題,為此,將離心腔密封,并由機(jī)械泵和擴(kuò)散泵串聯(lián)工作的真空泵系統(tǒng)抽成真空,溫度的變化容易控制,磨擦力很小,這樣才能達(dá)到所需的超高轉(zhuǎn)速。
2.轉(zhuǎn)頭:
⑴角式轉(zhuǎn)頭:角式轉(zhuǎn)頭是指離心管腔與轉(zhuǎn)軸成一定傾角的轉(zhuǎn)頭。它是由一塊完整的金屬制成的,其上有4~12個(gè)裝離心管用的機(jī)制孔穴,即離心管腔,孔穴的中心軸與旋轉(zhuǎn)軸之間的角度在20~40度之間,角度越大沉降越結(jié)實(shí),分離效果越好。這種轉(zhuǎn)頭的優(yōu)點(diǎn)是具有較大的容量,且重心低,運(yùn)轉(zhuǎn)平衡,壽命較長(zhǎng),顆粒在沉降時(shí)先沿離心力方向撞向離心管,然后再沿管壁滑向管底,因此管的一側(cè)就會(huì)出現(xiàn)顆粒沉積,此現(xiàn)象稱(chēng)為“壁效應(yīng)”,壁效應(yīng)容易使沉降顆粒受突然變速所產(chǎn)生的對(duì)流擾亂,影響分離效果。
?、剖幤绞睫D(zhuǎn)頭:這種轉(zhuǎn)頭是由吊著的4或6個(gè)自由活動(dòng)的吊桶(離心套管)構(gòu)成。當(dāng)轉(zhuǎn)頭靜止時(shí),吊桶垂直懸掛,當(dāng)轉(zhuǎn)頭轉(zhuǎn)速達(dá)到每分鐘200到800轉(zhuǎn)時(shí),吊桶蕩至水平位置,這種轉(zhuǎn)頭最適合做密度梯度區(qū)帶離心,其優(yōu)點(diǎn)是梯度物質(zhì)可放在保持垂直的離心管中,離心時(shí)被分離的樣品帶垂直于離心管縱軸,而不像角式轉(zhuǎn)頭中樣品沉淀物的界面與離心管成一定角度,因而有利于離心結(jié)束后由管內(nèi)分層取出已分離的各樣品帶。其缺點(diǎn)是顆粒沉降距離長(zhǎng),離心所需時(shí)間也長(zhǎng)。
?、菂^(qū)帶轉(zhuǎn)頭:區(qū)帶轉(zhuǎn)頭無(wú)離心管,主要由一個(gè)轉(zhuǎn)子桶和可旋開(kāi)的頂蓋組成,轉(zhuǎn)子桶中裝有十字型隔板裝置,把桶內(nèi)分隔成四個(gè)或多個(gè)扇形小室,隔板內(nèi)有導(dǎo)管,梯度液或樣品液從轉(zhuǎn)頭中央的進(jìn)液管泵入,通過(guò)這些導(dǎo)管分布到轉(zhuǎn)子四周,轉(zhuǎn)頭內(nèi)的隔板可保持樣品帶和梯度介質(zhì)的穩(wěn)定。沉降的樣品顆粒在區(qū)帶轉(zhuǎn)頭中的沉降情況不同于角式和外擺式轉(zhuǎn)頭,在徑向的散射離心力作用下,顆粒的沉降距離不變,因此區(qū)帶轉(zhuǎn)頭的“壁效應(yīng)”極小,可以避免區(qū)帶和沉降顆粒的紊亂,分離效果好,而且還有轉(zhuǎn)速高,容量大,回收梯度容易和不影響分辨率的優(yōu)點(diǎn),使超離心用于制備和工業(yè)生產(chǎn)成為可能。區(qū)帶轉(zhuǎn)頭的缺點(diǎn)是樣品和介質(zhì)直接接觸轉(zhuǎn)頭,耐腐蝕要求高,操作復(fù)雜。
?、却怪鞭D(zhuǎn)頭:其離心管是垂直放置,樣品顆粒的沉降距離最短,離心所需時(shí)間也短,適合用于密度梯度區(qū)帶離心,離心結(jié)束后液面和樣品區(qū)帶要作九十度轉(zhuǎn)向,因而降速要慢。
?、蛇B續(xù)流動(dòng)轉(zhuǎn)頭:可用于大量培養(yǎng)液或提取液的濃縮與分離,轉(zhuǎn)頭與區(qū)帶轉(zhuǎn)頭類(lèi)似,由轉(zhuǎn)子桶和有入口和出口的轉(zhuǎn)頭蓋及附屬裝置組成,離心時(shí)樣品液由入口連續(xù)流入轉(zhuǎn)頭,在離心力作用下,懸浮顆粒沉降于轉(zhuǎn)子桶壁,上清液由出口流出。
3.離心管:
離心管主要用塑料和不銹鋼制成,塑料離心管常用材料有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中PP管性能較好。塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。
不銹鋼管強(qiáng)度大,不變形,能抗熱,抗凍,抗化學(xué)腐蝕。但用時(shí)也應(yīng)避免接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品,如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等。
塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必須蓋嚴(yán),倒置不漏液。管蓋有三種作用:
?、俜乐箻悠吠庑?。用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí),這點(diǎn)尤其重要。②防止樣
品揮發(fā)。③支持離心管,防止離心管變形。
4.分析性離心機(jī):
分析性離心機(jī)使用了特殊設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)頭和光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng),以便連續(xù)地監(jiān)視物質(zhì)在一個(gè)離心場(chǎng)中的沉降過(guò)程。從而確定其物理性質(zhì)。
分析性超速離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭是橢圓形的,以避免應(yīng)力集中于孔處。此轉(zhuǎn)頭通過(guò)一個(gè)有柔性的軸聯(lián)接到一個(gè)高速的驅(qū)動(dòng)裝置上,轉(zhuǎn)頭在一個(gè)冷凍的和真空的腔中旋轉(zhuǎn),轉(zhuǎn)頭上有2~6個(gè)裝離心杯的小室,離心杯是扇形石英的,可以上下透光,離心機(jī)中裝有一個(gè)光學(xué)系統(tǒng),在整個(gè)離心期間都能通過(guò)紫外吸收或折射率的變化監(jiān)測(cè)離心杯中沉降著的物質(zhì),在預(yù)定的期間可以拍攝沉降物質(zhì)的照片,在分析離心杯中物質(zhì)沉降情況時(shí),在重顆粒和輕顆粒之間形成的界面就像一個(gè)折射的透鏡,結(jié)果在檢測(cè)系統(tǒng)的照像底板上產(chǎn)生了一個(gè)“峰”,由于沉降不斷進(jìn)行,界面向前推進(jìn),因此峰也移動(dòng),從峰移動(dòng)的速度可以計(jì)算出樣品顆粒的沉降速度。
分析性超速離心機(jī)和主要特點(diǎn)就是能在短時(shí)間內(nèi),用少量樣品就可以得到一些重要信息,能夠確定生物大分子是否存在,其大致的含量,計(jì)算生物大分子的沉降系數(shù),結(jié)合界面擴(kuò)散,估計(jì)分子的大小,檢測(cè)分子的不均一性及混合物中各組份的比例,測(cè)定生物大分子的分子量,還可以檢測(cè)生物大分子的構(gòu)象變化等。
制備性超速離心的分離方法:
1.差速沉降離心法:
這是最普通的離心法。即采用逐漸增加離心速度或低速和高速交替進(jìn)行離心,使沉降速度不同的顆粒,在不同的離心速度及不同離心時(shí)間下分批分離的方法。此法一般用于分離沉降系數(shù)相差較大的顆粒。
差速離心首先要選擇好顆粒沉降所需的離心力和離心時(shí)間。當(dāng)以一定的離心力在一定的離心時(shí)間內(nèi)進(jìn)行離心時(shí),在離心管底部就會(huì)得到最大和最重顆粒的沉淀,分出的上清液在加大轉(zhuǎn)速下再進(jìn)行離心,又得到第二部分較大較重顆粒的沉淀及含較小和較輕顆粒的上清液,如此多次離心處理,即能把液體中的不同顆粒較好地分離開(kāi)。此法所得的沉淀是不均一的,仍雜有其它成分,需經(jīng)過(guò)2~3次的再懸浮和再離心,才能得到較純的顆粒。
此法主要由于組織勻漿液中分離細(xì)胞器和病毒,其優(yōu)點(diǎn)是:操作簡(jiǎn)易,離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開(kāi),并可使用容量較大的角式轉(zhuǎn)子。缺點(diǎn)是:須多次離心,沉淀中有夾帶,分離效果差,不能一次得到純顆粒,沉淀于管底的顆粒受擠壓,容易變性失活。
2.密度梯度區(qū)帶離心法(簡(jiǎn)稱(chēng)區(qū)帶離心法):
區(qū)帶離心法是將樣品加在惰性梯度介質(zhì)中進(jìn)行離心沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區(qū)帶的分離方法。此法的優(yōu)點(diǎn)是:①分離效果好,可一次獲得較純顆粒;②適應(yīng)范圍廣,能象差速離心法一樣分離具有沉降系數(shù)差的顆粒,又能分離有一定浮力密度差的顆粒;③顆粒不會(huì)擠壓變形,能保持顆粒活性,并防止已形成的區(qū)帶由于對(duì)流而引起混合。
此法的缺點(diǎn)是:①離心時(shí)間較長(zhǎng);②需要制備惰性梯度介質(zhì)溶液;③操作嚴(yán)格,不易掌握。
密度梯度區(qū)帶離心法又可分為兩種:
(1)差速區(qū)帶離心法:當(dāng)不同的顆粒間存在沉降速度差時(shí)(不需要像差速沉降離心法所要求的那樣大的沉降系數(shù)差)。在一定的離心力作用下,顆粒各自以一定的速度沉降,在密度梯度介質(zhì)的不同區(qū)域上形成區(qū)帶的方法稱(chēng)為差速區(qū)帶離心法。此法僅用于分離有一定沉降系數(shù)差的顆粒(20%的沉降系數(shù)差或更少)或分子量相差3倍的蛋白質(zhì),與顆粒的密度無(wú)關(guān),大小相同,密度不同的顆粒(如線粒體,溶酶體等)不能用此法分離。
離心管先裝好密度梯度介質(zhì)溶液,樣品液加在梯度介質(zhì)的液面上,離心時(shí),由于離心力的作用,顆粒離開(kāi)原樣品層,按不同沉降速度向管底沉降,離心一定時(shí)間后,沉降的顆粒逐漸分開(kāi),最后形成一系列界面清楚的不連續(xù)區(qū)帶,沉降系數(shù)越大,往下沉降越快,所呈現(xiàn)的區(qū)帶也越低,離心必須在沉降最快的大顆粒到達(dá)管底前結(jié)束,樣品顆粒的密度要大于梯度介質(zhì)的密度。梯度介質(zhì)通常用蔗糖溶液,其最大密度和濃度可達(dá)1.28kg/cm3和60%。
此離心法的關(guān)鍵是選擇合適的離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間
(2)等密度區(qū)帶離心法:離心管中預(yù)先放置好梯度介質(zhì),樣品加在梯度液面上,或樣品預(yù)先與梯度介質(zhì)溶液混合后裝入離心管,通過(guò)離心形成梯度,這就是預(yù)形成梯度和離心形成梯度的等密度區(qū)帶離心產(chǎn)生梯度的二種方式。
離心時(shí),樣品的不同顆粒向上浮起,一直移動(dòng)到與它們的密度相等的等密度點(diǎn)的特定梯度位置上,形成幾條不同的區(qū)帶,這就是等密度離心法。體系到達(dá)平衡狀態(tài)后,再延長(zhǎng)離心時(shí)間和提高轉(zhuǎn)速已無(wú)意義,處于等密度點(diǎn)上的樣品顆粒的區(qū)帶形狀和位置均不再受離心時(shí)間所影響,提高轉(zhuǎn)速可以縮短達(dá)到平衡的時(shí)間,離心所需時(shí)間以最小顆粒到達(dá)等密度點(diǎn)(即平衡點(diǎn))的時(shí)間為基準(zhǔn),有時(shí)長(zhǎng)達(dá)數(shù)日。
等密度離心法的分離效率取決于樣品顆粒的浮力密度差,密度差越大,分離效果越好,與顆粒大小和形狀無(wú)關(guān),但大小和形狀決定著達(dá)到平衡的速度、時(shí)間和區(qū)帶寬度。
等密度區(qū)帶離心法所用的梯度介質(zhì)通常為氯化絕CSCl,其密度可達(dá)1.7g/cm3。此法可分離核酸、亞細(xì)胞器等,也可以分離復(fù)合蛋白質(zhì),但簡(jiǎn)單蛋白質(zhì)不適用。
收集區(qū)帶的方法有許多種,例如:
(1)用注射器和滴管由離心管上部吸出。
(2)有針刺穿離心管底部滴出。
(3)用針刺穿離心管區(qū)帶部份的管壁,把樣品區(qū)帶抽出。
(4)用一根細(xì)管插入離心管底,泵入超過(guò)梯度介質(zhì)最大密度的取代液,將樣品和梯度介質(zhì)壓出,用自動(dòng)部分收集器收集。
離心操作的注意事項(xiàng)
高速與超速離心機(jī)是生化實(shí)驗(yàn)教學(xué)和生化科研的重要精密設(shè)備,因其轉(zhuǎn)速高,產(chǎn)生的離心力大,使用不當(dāng)或缺乏定期的檢修和保養(yǎng),都可能發(fā)生嚴(yán)重事故,因此使用離心機(jī)時(shí)都必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。
1.使用各種離心機(jī)時(shí),必須事先在天平上精密地平衡離心管和其內(nèi)容物,平衡時(shí)重量之差不得超過(guò)各個(gè)離心機(jī)說(shuō)明書(shū)上所規(guī)定的范圍,每個(gè)離心機(jī)不同的轉(zhuǎn)頭有各自的允許差值,轉(zhuǎn)頭中絕對(duì)不能裝載單數(shù)的管子,當(dāng)轉(zhuǎn)頭只是部分裝載時(shí),管子必須互相對(duì)稱(chēng)地放在轉(zhuǎn)頭中,以便使負(fù)載均勻地分布在轉(zhuǎn)頭的周?chē)?BR>
2.裝載溶液時(shí),要根據(jù)各種離心機(jī)的具體操作說(shuō)明進(jìn)行,根據(jù)待離心液體的性質(zhì)及體積選用適合的離心管,有的離心管無(wú)蓋,液體不得裝得過(guò)多,以防離心時(shí)甩出,造成轉(zhuǎn)頭不平衡、生銹或被腐蝕,而制備性超速離心機(jī)的離心管,則常常要求必須將液體裝滿,以免離心時(shí)塑料離心管的上部凹陷變形。每次使用后,必須仔細(xì)檢查轉(zhuǎn)頭,及時(shí)清洗、擦干,轉(zhuǎn)頭是離心機(jī)中須重點(diǎn)保護(hù)的部件,搬動(dòng)時(shí)要小心,不能碰撞,避免造成傷痕,轉(zhuǎn)頭長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí),要涂上一層上光臘保護(hù),嚴(yán)禁使用顯著變形、損傷或老化的離心管。
3.若要在低于室溫的溫度下離心時(shí)。轉(zhuǎn)頭在使用前應(yīng)放置在冰箱或置于離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭室內(nèi)預(yù)冷。
4.離心過(guò)程中不得隨意離開(kāi),應(yīng)隨時(shí)觀察離心機(jī)上的儀表是否正常工作,如有異常的聲音應(yīng)立即停機(jī)檢查,及時(shí)排除故障。
5.每個(gè)轉(zhuǎn)頭各有其最高允許轉(zhuǎn)速和使用累積限時(shí),使用轉(zhuǎn)頭時(shí)要查閱說(shuō)明書(shū),不得過(guò)速使用。每一轉(zhuǎn)頭都要有一份使用檔案,記錄累積的使用時(shí)間,若超過(guò)了該轉(zhuǎn)頭的最高使用限時(shí),則須按規(guī)定降速使用。
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